全球疫情拐点已现，关键点原来是它
据伦敦时间3月6号ourworldindata的数据显示，全球共接种约3亿人次的疫苗。目前COVID-19疫苗接种至少单针剂量总量靠前的国家和地区有：美国、中国、欧盟、英国、巴西、以色列等。美国与英国分别是在当地时间2020年12月8日和14日开始接种COVID-19疫苗，截止到2021年3月6号，美国和英国已经完成8791万人和2289万人份的疫苗注射。通过统计发现两个国家的新增确诊人数和疫苗接种量数据可以看出，随着疫苗的接种量增加新增确诊呈现出大幅下降的趋势[1]。
数据来源：ourworldindata
美国和英国使用最多的疫苗是Pfizer/BioNTech 和Moderna 公司基于mRNA技术平台开发的mRNA疫苗。所使用的mRNA疫苗就是将RNA在体外进行相关的修饰后传递至机体细胞内表达并产生蛋白抗原，从而导机体产生针对该抗原的免疫应答，进而扩大机体的免疫能力[2,3]。mRNA疫苗是第三代的疫苗类型，是继灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗后新型的疫苗技术路线。与其他类型的疫苗相比，mRNA疫苗具有安全、高效、生产便捷、开发周期短等优点，具有极大的发展潜力。
图：美国使用的COVID-19疫苗制造商及占比。数据来源：ourworldindata
mRNA疫苗体外开发流程包括mRNA体外合成、修饰和纯化等操作。由于RNA的不稳定性，完整的mRNA结构有利于mRNA的稳定性和表达能力。在体外合成的mRNA在添加一些基本结构元件才能达到与真核细胞mRNA相似的稳定效果，如在其蛋白编码的开放阅读框(ORF) 5’端添加m7GPPPN结构即7-甲基鸟苷帽子结构和3’端poly(A)尾以促进mRNA的稳定性。其中5’端加帽是重要的过程，此过程常应用酶学法加帽如牛痘病毒加帽酶（Vaccinia Capping Enzyme）。
图：A typical mRNA construct with supporting untranslated regions, poly(A) tail, and an optional signal peptide sequence attached to the coding sequence[4]
翌圣生物作为国内分子酶产业创新领导者，通过先进的分子酶双向技术平台、大规模蛋白发酵纯化技术平台，提供低残留和高效率加帽的Vaccinia Capping Enzyme（牛痘病毒加帽酶），经过GMP工艺生产获得，完全满足疫苗生产所需，并提供其他mRNA疫苗相关的酶和试剂。
翌圣生物GMP级别Vaccinia Capping Enzyme
|
检测项目 |
质量标准 |
检测方法 |
|
活性 |
甲基转移酶活性≥1×104U/mL |
高效液相反相柱层析法 |
|
蛋白含量 |
≥0.1mg/mL |
BCA法 |
|
蛋白纯度 |
≥95% |
SDS-PAGE还原胶 |
|
核酸外切酶 |
阴性 |
参照内部方法 |
|
切口酶 |
阴性 |
参照内部方法 |
|
RNA酶 |
符合要求 |
参照内部方法 |
|
细菌内毒素 |
符合要求 |
凝胶法 |
|
宿主蛋白 |
阴性 |
ELISA法 |
|
宿主DNA |
阴性 |
Q-PCR法 |
|
无菌检查 |
无菌生长 |
通则1101 |
|
病原体检查 |
阴性(不得检出) |
参照内部方法 |
|
支原体检查 |
阴性(不得检出) |
支原体检测试剂盒 |
注：具体质检标准及数据参考具体批次COA
加帽效率测定
质谱测定加帽酶的加帽效率，并与对照品进行对比，可以发现翌圣的加帽酶的加帽效率较高，获得的产物的纯度也较高。
残留检测
分别检测Rnase、核酸酶、切口酶、大肠杆菌DNA残留，经检测结果显示，成品无相关酶的残留，且表达的宿主DNA残留也达到了使用要求标准。
翌圣生物作为分子酶领域创新领导者，专注为您提供高品质的分子酶产品及mRNA疫苗相关试剂，为您的mRNA疫苗研究和生产开发提供更多选择和方便。
相关产品
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
UCF.METM mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade |
10614ES84/92 |
2000/10000U |
|
UCF.METM mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase GMP-grade |
10612ES84/92 |
2000/10000U |
|
UCF.METM T7 RNA Polymerase GMP-grade（1 KU/μl） |
10613ES92/97 |
10/50KU |
|
UCF.METM Murine RNase inhibitor GMP-grade |
10621ES10/20 |
10/20 KU |
|
UCF.METM Pyrophosphatase,Inorganic GMP-grade |
10620ES10/60 |
10/100U |
|
UCF.METM DNase I , RNase-free ，GMP-grade |
10611ES76/84 |
500/2000U |
|
Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit |
10623ES50/60 |
50/100T |
|
S-adenosylmethionine (SAM) |
10619ES02 |
0.5ml |
|
GTP Solution(100mM) |
10132ES03 |
1ml |
|
NTP Set Solution(ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each） |
10133ES03 |
1 Set (4 vial) |
[1] https://ourworldindata.org/covid-vaccinations
[2]苗鹤凡, 郭勇, 江新香. mRNA疫苗研究进展及挑战[J]. 免疫学杂志, 2016(05):446-449.
[3] Kramps T., Elbers K. (2017) Introduction to RNA Vaccines. In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines. Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
[4] Versteeg L, Almutairi MM, Hotez PJ, Pollet J. Enlisting the mRNA Vaccine Platform to Combat Parasitic Infections. Vaccines (Basel). 2019;7(4):122. Published 2019 Sep 20.